[摘要]  目的  研究高压氧(HBO)对动物牙周炎袋底细菌数量的影响。方法  用丝线缝扎加喂含10％糖的食料形成动物牙周炎，用0．25 MPa HBO暴露60 min，每日1次，连续2周。在0、8周及治疗结束时(10周)和结束后1个月(14周)时用刚果红负性染色法观察牙周袋袋底菌斑不同形态细菌比率，用厌氧手套培养箱对袋底厌氧菌计数。结果  HBO治疗结束时(10周)球菌比率较牙周炎组明显增加，螺旋体、直杆菌、弯杆菌、梭状菌比率均减少，厌氧菌总数明显减少。14周时球菌、直杆菌、杆菌、梭状菌、螺旋体比率和厌氧菌总数与10周时相近(p>0．05)。结论  HBO治疗能使牙周袋底直杆菌、弯杆菌、梭状菌、螺旋体比率明显减少，且作用维持1个月以上。
[关键词]  牙周炎；高压氧；菌斑；厌氧菌；豚鼠
    高压氧(HBO)能使人牙周袋内的致病菌数量明显减少「1」。但对动物牙周袋底菌斑细菌的作用未见报道。本研究用丝线缝扎和高糖喂养形成实验性牙周炎，观察HBO对牙周袋底细菌数量的影响，为HBO治疗牙周炎的临床应用提供依据。
1  材料与方法
1．1  动物分组
    选取豚鼠60只，雌雄各30只，体重为300 g左右。随机分为3组：HBO组、牙周炎组和对照组，每组20只，雌雄各半。
1．2  方法
    HBO组：用丝线缝扎加喂含10％糖的食料形成牙周炎「2」，在实验8周时每日1次用0．25 Mpa HBO暴露60 min，连续2周，治疗结束后1个月终止实验；牙周炎组：用丝线缝扎加喂高糖食料同上，但不进行HBO暴露；对照组：常规喂养。
1．3  袋底菌斑采集、染色和不同形态细菌的计数
    在0、8、10、14周时将牙面擦干，每只动物用无菌刮治器放于袋底取1颗牙牙周袋袋底菌斑(牙周袋深度为2．5-4．0mm)制成涂片，用刚果红负性染色法染色后在暗视野下镜检，用油镜观察，随机选择视野，每例计数200个细菌，分别求出球菌、直杆菌、弯杆菌、梭状菌和螺旋体所占的百分比「3」。
1．4袋底厌氧菌计数
     在0、8、10、14周时取1颗牙牙周袋袋底菌斑，放人盛有1．0ml的硫乙醇酸盐溶液的小瓶中，超声粉碎后，立即作厌氧菌分离。将标本按10-1—10-7作系列10倍数稀释，用L棒CDC厌氧基础培养基，在厌氧手套培养箱中37℃培养3—7d，选择适宜稀释度平板计数，并计算其厌氧菌数「4」。
1．5  统计分析
  用团体t检验和完全随机资料方差分析进行统计学处理。
2  结果
    HBO对牙周袋底菌斑的影响见表1、2。

    表1  10周和14周时各组牙周袋底菌斑比较(x±s，％)

  与对照组比较，*p<0．01；与牙周炎组比较，#p<0．01；与牙周炎组比较，+p<0．05
    牙周炎组：在0—14周时，球菌比率逐渐减少，直杆菌、弯杆菌、梭状菌和螺旋体比率逐渐增加，螺旋体比率增加最明显。HBO组：在0和8周时球菌、直杆菌、弯杆菌、梭状菌和螺旋体比率与牙周炎组变化相似，10周时球菌比率较牙周炎组明显增加，螺旋体比率明显减少(p<0．01)，直杆菌、弯杆菌、梭状菌比率轻度减少。14周时直杆菌、弯杆菌、梭状菌和螺旋体比率与10周时相近(p>0．05)。

    表2  10周和14周时各组牙周袋底厌氧菌比较(CFU／m1)

   与对照组相比，*p<0．01；与牙周炎组相比，#p<0．01；与10周相比，+p<0．01
    对照组：各时间点厌氧菌数基本相似，厌氧菌数变化位于10—31CFU／ml，差异无显著性。牙周炎组：在0—14周时，厌氧菌数量增加，8、10和14周时厌氧菌数比0周时增加(p<0．01)，14周时厌氧菌数较10周增加。HBO组：0—8周时厌氧菌数与牙周炎组变化相似，10周时厌氧菌数比牙周炎组减少(p<0．01)，14周时厌氧菌数与10周时相近，差异无显著性(p>0．05)。
3  讨论
    牙周炎时，牙周组织氧耗量增加，牙周袋底和组织中氧含量降低，厌氧菌生长繁殖加快「5」。用HBO治疗可增加局部氧含量，厌氧菌生长受抑制。有作者报道，细菌可分泌酶分解胶原，破坏牙周组织「6」。当组织缺氧时，伤口处细菌增多，相反，当组织血运丰富，氧含量增加，厌氧菌减少，组织不易感染「7」。HBO治疗后，细菌数量及分泌的酶减少。氧在0．28Mpa时能完全抑制干酪乳杆菌生长。间断用3 Mpa HBO治疗2次共3h，发现能抑制放线菌、黏膜炎双球菌生长「8」。表明HBO可通过抑制细菌分裂繁殖对牙周炎起治疗作用。本研究分别用暗视野观察和
厌氧菌培养法观察牙周袋底不同形态细菌变化，结果发现，HBO能使牙周袋底的杆菌、梭状菌和螺旋体比率明显减少，尤其是使牙周袋底的厌氧致病菌减少，且作用维持1个月以上。