| 在龋病的发生发展过程中,酸起着非常重要的作用,尤其是乳酸,很多口腔细胞菌代谢都能产生乳酸。研究表明菌斑接触蔗糖后pH值迅速下降,乳酸含量迅速增加,其他有机酸含量无明显变化。早在本世纪30年代国外就有学者[1]对牙齿的电化学性质作了系统的研究,对牙齿的电化学性质与龋病的关系也作了探索,他们认为酸通过改变牙齿的电化学性质来达到致龋的目的。Tung[2]认为牙釉质膜电位在低pH时降低,这可能是由于低pH时溶液中Ca2+与H+浓度的增加,继而这两种离子在牙釉质表面的吸附增加,另一方面,在高pH时,pH的作用主要是OH-的吸附所致。本研究在人工唾液不同pH值时,通过对牙齿表面电位的测定,来观察牙齿表面电位随着人工唾液pH的变化,情况并探讨二者之间的关系,从而揭示酸的致龋机理,为龋病发病机理的研究提供一些实验数据。
1 材料和方法 1.1 主要实验仪器及试剂 本实验所用实验仪器包括:SPM-10型pH计,221型pH电极,TG328B电光分析天平,222型甘汞电极一对及高内阻电压表(DT890/890A)等,所用试剂则包括乳酸、氯化钙、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、羟乙基纤维素及饱和KCL等。
2 实验方法 2.1 实验牙齿的选择及处理 选择完整无龋,新鲜拔除的牙齿(包括前后牙)50颗,患者年龄为13~50岁,男女不限,经肥皂水洗刷,超声洗涤十分钟,完全去除牙齿表面的软垢、牙石等,洗刷时动作要轻,注意勿损伤牙釉质及牙骨质表面,用大量去离子水加压冲洗半小时。然后将50颗牙齿随机平均分成A、B两组,A组储存于蒸馏水中备用,牙齿根管不作处理,B组从根尖处拔髓并扩通根管动作要轻,边扩边用去离子水冲洗根管,直到彻底冲洗干净为止,最后储存于蒸馏水中备用。
2.2 电位测定 (1)固定牙齿 将牙齿从去离子水中取出后轻轻拭去水分。把牙颈部固定于自制的固定架上使牙冠与牙根暴露。(2)连接电路 将两个型号相同的甘汞电极分别放于盛有饱和KCL溶液的小烧杯中(使用前甘汞电极在饱和KCL溶液中浸泡10小时以上,使其稳定),并分别与高内阻电位表的正负极相连,将作好的饱和KCL盐桥也放入小烧杯中。测量前记录两甘汞电极之间的电位。(参见图1)。(3)A组用浸有人工唾液(pH用乳酸调配分别为7.5、7.0、6.5、6.0、5.5、5.0、4.5、4.0、3.5、3.0、2.5)的脱脂棉片包裹牙冠,生理盐水棉片包裹牙根;在牙颈部注意勿使二者连接,以免电路导通。将正极盐桥放于牙根部中点,负极盐桥放于牙冠窝沟部,电位表上即可读出牙根与牙冠各点之间的电位值,读数时注意牙冠每移动一点待1~2分钟电位稳定后再做记录,记录三个数值,以三者的均值作为该点的电位值,记录完毕后重新测两甘汞电极间的电位作为校正电位,然后从所测得的电位中减去校正电位,即为实际电位VE-C。测量示意图见图1。B组根管内充满生理盐水并与牙根部生理盐水导通,冠部溶液不变,记录牙冠部相对牙根中点的电位,记录方法同A组。测量示意图见图2。(4)牙齿每次测定后立即用大量去离子水加压冲洗30分钟,然后重新放入去离子水中,过24小时后进行另一组的测定。测量时注意使用人工唾液时先测pH值高组,后测pH值低组。
〖TPB2,+45mm〗 〖TS(〗〖HTK〗〖JZ(〗图1 牙齿表面电位(根管无电解质溶液组)测量示意图 →←牙齿固定架,—盐桥, 〖XZ(90〗〖XZ)〗电极〖JZ)〗〖TS)〗
〖TPB1,+45mm〗 〖TS(〗〖HTK〗〖JZ(〗图2 牙齿表面电位(根管充满电解质溶液组)测量示意图 →←牙齿固定架,—盐桥, 〖XZ(90〗〖XZ)〗电极〖JZ)〗〖TS)〗
〖JZ(〗附表1 人工唾液不同pH值时的牙齿表面电位VE-C(mV)〖JZ)〗 〖BG(〗〖BHDFG2,WK8,WK8,WK9W〗 pH值 A组 B组 〖BHDG1*3〗7.5 -32.44±10.19 -19.48±4.32 〖BHDW〗7.0 -34.31±13.20 -20.2±33.67 〖BH〗6.5 -33.65±14.10 -20.24±3.81 〖BH〗6.0 -35.00±15.21 -21.06±4.44 〖BH〗5.5 -37.16±15.45 -22.54±5.37 〖BH〗5.0 -38.78±15.85 -23.17±5.86 〖BH〗4.5 -40.48±16.43 -24.59±5.90 〖BH〗4.0 -42.46±16.30 -25.33±6.65 〖BH〗3.5 -44.34±17.07 -27.29±6.64 〖BH〗3.0 -46.25±17.47 -29.32±8.20 〖BH〗2.5 -56.38±21.66 -37.69±10.30〖BG)F〗
3 结 果 测量结果发现,牙冠相对牙根中点的电位为负电位。随着冠部人工唾液pH值的降低,牙齿表面电位逐渐降低,(详见附表1,附图3)。对实验数据进行方差分析结果详见附表2。A组pH值4.00时电位降低明显,与pH值7.50组差别显著;B组pH值4.50时电位降低明显,与pH值7.50、7.00、6.50组差别显著。这与活体牙患龋临界p值很接近。 |